RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

众所周知,基础科研离不开实验操作,而我们科研小白总是在实验实操中手忙脚乱,不知道如何避免操作失误,也不知道咋解决在实验中遇到疑难杂症,辛辛苦苦重复了好多次的实验,总是折在某个环节……

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

其实,实验操作并没有想象中那么难,难就难在我们没有真正掌握实验原理,没有把握住实验过程中需要注意的细节。
比如:
在RT-PCR 实验中,RT试剂盒从冰箱拿出,应该充分解冻,瞬离后,混匀,放于冰上,可在冰上加样。试剂可以用数字贴纸编号,避免漏加、错加试剂。
在RNA 抽提实验中,要避免外源酶的污染,外源酶会造成 RNA 的降解,造成 RNA 得率太低,或者彻底失败,而外源酶又是无处不在的。
在Western blot 实验中,配胶时,建议先加水,再加Tris-HCL缓冲液,并且每加一种液体就混匀胶液。加入的TEMED有毒,务必在通风橱中操作,并且加入后立即混匀、灌胶。
……
实验中需要注意的细节很多,一着不慎满盘皆输。为了帮助大家解决实验过程中面临的重重难题,解螺旋整理了这份《酸谈实验资料包》,包含40+基础实验、8+热门实验详细教程,更有文献场景还原猫大亲测试剂种草,全方位帮你填平实验的坑。

目录↓↓↓

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

除了详细的实验课件,我们还专门配套了实验笔记和补充资料,方便大家更好地学习消化。

更重要的是,解螺旋高级讲师猫大老师将用自己的实战经验为你铺路,从讲原理到秀实操,从试剂推荐到疑难杂症的解析,手把手教大家实战技能。

讲师介绍↓↓↓

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

适合人群↓↓↓

对科研中常规实验的原理一知半解的同学

实操中手忙脚乱,不知道如何避免操作失误的同学

不知道如何分析实验结果的同学

不了解实验中可能要使用到的试剂盒的同学

不知道如何解决实验中的疑难杂症的同学

点击了解详情免费领取资料,跟着猫大老师学实验,逐个击破实验中遇到的各种疑难杂症,科研小白也适合哦!

1

40+基础实验全面覆盖 填平实验中遇到的坑

为了帮助大家解决实验过程中面临的重重难题,酸谈实验课程手把手教大家40+基础实验,包括13个表达检测实验、16个表型检测实验、11个机制探索实验,每个实验都详细介绍了样品制备、操作要点、数据分析,填平你在实验中遇到的坑……

1

13个表达检测实验

1.DNA 甲基化芯片

高通量甲基化芯片 Infinium Human Methylation 450K BeadChip 能够对人全基因组45万个甲基化位点进行检测,覆盖了上一代 27K 甲基化芯片 90%的位点,并同时增加了 CpG 岛以外的 CpG 位点、人类干细胞非 CpG 甲基化位点、正常组织与肿瘤(多种癌症)组织差异甲基化位点、编码区以外的 CpG 岛、miRNA 启动子区域和已通过 GWAS 的疾病相关区域的位点。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

2.第二代 DNA 测序技术

Illumina/Solexa Genome Analyzer 测序的基本原理是边合成边测序。在 Sanger 等测序方法的基础上,通过技术创新,用不同颜色的荧光标记四种不同的 dNTP,当 DNA 聚合酶合成互补链时,每添加一种 dNTP 就会释放出不同的荧光,根据捕捉的荧光信号并经过特定的计算机软件处理,从而获得待测 DNA 的序列信息。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

3.基因芯片

基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

4.高通量检测

高通量检测技术可以一次检测多个样品中成千上万个基因的变化,根据高通量技术的不同,可以检测不同的变化,不仅可以检测 DNA、RNA、蛋白的丰度,还可以检测修饰程度,如蛋白磷酸化,DNA 甲基化等等。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

5.circRNA 实验

从组织或细胞中提取的 total RNA 中,通常含有多种 RNA,circRNA 实验首先要去除样 本中的核糖体 RNA 和 poly-A RNA 干扰,并用 RNase 酶消化掉线性 RNA,使 circRNA 富集, 这样才能对 circRNA 进行准确分析。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

2

16个表型检测实验

1.细胞增殖

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖,我们将为大家详细介绍3D 肿瘤球形成实验、MTT 增殖实验、克隆形成实验、细胞增殖检测实验方法

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

2.细胞周期检测实验

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

3.细胞凋亡

细胞凋亡是细胞死亡的一种类型,酸谈实验课程包含细胞凋亡检测(TUNEL 法)、AnexinV/7AAD 双染色检测细胞凋亡、线粒体膜电位检测等细胞凋亡实验。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

4.血管新生

血管新生是在原有的毛细血管或者微静脉基础上,通过内皮细胞的增殖、分化和迁移,以芽生或非芽生的形式生成新生的血管。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

3

11个机制探索实验

1.信号转导

信号通路是指生物学信号从细胞外向细胞内传递的过程,通过这种信号的传递对细胞内的生物学过程进行调控。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

2.转录调控

随着分子生物学研究方法的不断发展,转录调控的研究也来越火热,酸谈实验课程整理了转录调控方向实验Protocol,涵盖实验原理、实验操作流程、实验操作要点、实验分组设计、数据处理与绘图……

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

点击了解详情免费领取资料,跟着猫大老师学实验,逐个击破实验中遇到的各种疑难杂症,科研小白也适合哦!

2

8+热门实验protocol分享 手把手教你实操

辛辛苦苦做实验发文章,如果因为实验中的某个环节出了问题而功亏一篑,实在太可惜了。

酸谈实验课程为大家分享8+热门实验protocol,包括反转录PCR、PCR引物设计、RNA抽提、RT-PCR、WB、Transwell、免疫组化图像分析、常用信号通路套路等

1

反转录PCR

RNA反转录合成cDNA,以cDNA为模板经过变性(让cDNA能够充分打开)、 退火(让引物结合到模板DNA上)和延伸(让DNA聚合酶(Taq酶)开始合成DNA, 让新的DNA链按照模板的碱基顺序延长下去)等过程扩增出很多的目的片段。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

2

PCR引物设计

引物设计是PCR技术中至关重要的一环,使用不合适的PCR引物容易导致实验失败。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

3

RNA抽提

RNA抽提有很多种方法,其中TRIzol法是最流行的。TRIzol法很快速,且能抽提多种属总RNA,对少量的组织和细胞以及大量的组织和细胞都能有效分离,能抽提不同分子量大小的多种RNA,避免DNA和蛋白的污染,抽提出来的RNA适用于多种实验。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

4

RT-PCR

全称反转录·聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是将RNA 的反转录和cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

5

Western Blotting

蛋白免疫印迹(Western Blotting)是将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到NC膜或PVDF膜上,然后用特异 性抗体检测某特定蛋白的一种蛋白质检测技术。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

5

免疫组化图像分析

使用IPP6软件分析单张免疫组化图像、分析多张免疫组化图像、批量分析免疫组化图像,包括校正图片、选定测量项目、选定测量范围、测量、输出数据等详细步骤。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

6

细胞划痕实验Transwell

Transwell 是一类有通透性的杯状的装置,放入培养板后,分为两室:Transwell 小室内称上室,盛装上层培养液;培养板内称下室,盛装下层培养液。上下层培养液以聚碳酸酯膜(Polycarbonate Membrane)相隔。

细胞种在上室内,因聚碳酸酯膜有通透性,故可研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

3

文献场景还原 猫大亲测试剂种草

多读文献可以帮我们了解前沿研究动态和进展,找到立论依据,获得实验设计灵感。

当然,文献阅读也是讲究方法的,猫大老师为大家精选了多篇经典文献,通过还原文献场景,复现材料方法和结果部分写作套路,更有猫大亲测试剂种草,全方位帮你避坑~

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

RT-PCR、RNA抽提、WB等40+实验教程汇总!(内附试剂推荐)

以上所有资源,点击了解详情免费领取。如果你在实验实操中手忙脚乱,不知道如何避免操作失误,不知道如何解决实验中的疑难杂症,那酸谈实验室课程绝对是你的“救星”,赶紧领取吧!

本网页内容旨在传播知识,若有侵权等问题请及时与本网联系,我们将在第一时间删除处理。E-MAIL:dandanxi6@qq.com

(0)
上一篇 2023-02-06 15:52
下一篇 2023-02-06 16:39

相关推荐

  • 金庸和梁羽生作品的区别

    小说这种体裁的作品,可以说是现在我们很多人都离不开的一种文学作品了,就连我父母学会使用智能机以后,现在都会在网上去看小说了。而小说这种题材的作品是起源于什么时候呢?相信很多人都听说…

    2023-02-05
  • 如何克服心里的紧张

    1.微笑。当你特别紧张时,不妨面带微笑。为此,请你放松你的下巴,抬起你的脸颊,张开你的嘴唇,向上翘起你的嘴角,用轻松欢快的节奏对你自己说:“忆些趣事”,它将使你意识到脸、心和脑之间…

    用户投稿 2022-12-02
  • 红色在传统的中国文化中为吉祥色

    凡遵守周礼尚赤的人和族称为华人,通称诸华。 将红色当作自己的民族称谓,可见中国人对红色的喜爱非同一般。 在中国古代“五行”之说中,赤色,五行中属火,对应着南方,所以,红色属于中华大…

    2023-07-24
  • 李世民的后妃们,你还知道哪些事

    1、长孙皇后 文德皇后长孙氏(601年3月15日—636年7月28日),小字观音婢 ,河南洛阳人,隋朝右骁卫将军长孙晟之女,母亲高氏为汉族,唐朝宰相长孙无忌同母妹, 唐太宗(李世民…

    用户投稿 2022-12-09
  • 夫妻双方去亲戚家能睡一个房间吗

    个人觉得还是要看具体情况来安排,比如: 1.如果亲戚多房间少,安排同一个房间挤挤,那也是没办法的情况,想必都能理解。 2.如果亲戚少,房间足够,那我想很多人更喜欢分开几个房间,毕竟…

    2022-11-19
  • 黄晓明张翰图片

    文/文刀贰 黄晓明被大家戏称为“黄教主”,叫他教主没有别的意思,主要是有些影视综动作太油腻了! 最出名的就是他在《中餐厅》中的“明言明语”: “我不要你觉得,我要我觉得,你觉得不管…

    2022-12-14
  • 成语画蛇添足讲解(画蛇添足成语动画)

    古时候,楚国有一家人,祭完祖之后,准备将祭祀用的一壶酒,赏给帮忙办事的人喝。帮忙办事的人很多,这壶酒如果大家都喝是不够的,若是让一个人喝,那能喝得有余。这一壶酒到底怎么分呢? 大家…

    2023-04-17
  • 什么生肖能成大器,什么生肖的人事业力最强

    有器量的人必然前途光明,能成大事,并且总是和钱和贵人有缘。毕竟有勇有谋的人大有人在,但肚子里能撑船的宰相却是有数的。 1.随时蓄势待发的生肖龙。 属龙人是时刻为理想准备着的人。他们…

    2023-06-21
  • 周伯通被黄药师打断双腿如何治愈

    在《射雕英雄传》中,有一明一暗两条重要的线索贯穿始终,明线是华山论剑,暗线是人人都想据为己有的《九阴真经》。 没有《九阴真经》出现,就不会引发大范围的抢夺事件,王重阳也没必要举办华…

    2022-12-30
  • 为什么大学生的含金量越来越低

    尤其指七八十年代的大学生,以前我也这么认为的,那个年代招生数量少,所以都是很优秀的。直到我接触了不少那个年代的大学生、中专生,发现不是这么回事。 同等级别的学校,那个年代的大学生并…

    2023-05-21